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在千萬億分之一秒內解讀生命,描繪無限清潔能源未來
2017/08/09 13:54
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在加利福尼亞州帕羅奧多市(Palo Alto)附近的一座山腳下,科學家在位於地下的實驗室裏忙碌地穿梭著,為一系列爆炸實驗做最後準備。他們的計畫是:炸飛微小的蛋白質晶體,揭開大自然最神奇的秘密,即植物的光合作用如何把光轉化為化學能。如果他們成功了,人類很可能就將邁進無限清潔能源時代!

200912月,一群缺少睡眠的研究人員和學生已經在斯坦福國家加速器實驗室(SLAC)連續工作了數天,為一項實驗做最後的準備。SLAC擁有世界上最強大的X射線雷射器:直線加速器相干光源(LCLS),能夠將電子加速至接近光速。其中一組人員正在緊張地調試著蛋白質晶體噴頭,將它對準鐳射。另一組則把蛋白質晶體裝入噴射器,這裏用到的是光系統I蛋白,這種蛋白在光合作用中扮演著重要角色。

在兩英里加速器隧道盡頭,蛋白質晶體將擁抱熾熱的鐳射。在晶體爆炸之前,科學家會用一種新技術給它照張相。這項新技術能夠在幾飛秒內,也就是千萬億分之一秒,採集一系列圖像,並合成動畫。借助這項技術,科學家有望在最細微的尺度上重塑人們對生物學的理解。

關鍵的10飛秒

製作分子電影的第一步開始於2000年,當時都在瑞典烏普薩拉大學的分子生物物理學家亞諾什·豪伊多(Janos Hajdu)和理查德·諾伊策(Richard Neutze)通過計算發現,被X射線擊中的分子會在10飛秒後爆炸。

SFX成像技術的關鍵就在於,從分子被X射線鐳射脈衝擊中,到分子上的電子被高能X射線剝離前,存在幾乎難以察覺的極短間隔。一旦失去電子,分子上帶正電的殘餘部分相互排斥,導致分子擴張並最終爆炸。

我們的做法是,先讓蛋白質分子相互作用並形成微小晶體;然後,向晶體發射高能X射線鐳射脈衝,鐳射脈衝非常短,足夠在鐳射肢解分子之前,允許X射線從分子表面散射出去;緊接著,檢測器捕獲散射的X射線,通過分析散射圖案得到蛋白質分子中原子的類型和位置。把蛋白質晶體束從不同角度射入X射線,我們就能重建它的3-D結構。最後,收集同一個反應在不同時間點的圖像,並按照時間順序組合起來,我們就能把反應過程用電影記錄下來。

光系統蛋白成像

彼得拉·弗魯姆(Petra Fromme,本文作者之一)和她的團隊決定用你能想像到的最難的實驗來證明SFX成像技術:光系統I。這個系統包含36個蛋白和300多個捕捉光子的綠色素和橙色素,是迄今為止用X射線分析過的最複雜的蛋白結構。弗魯姆對光系統I有著深刻的理解,她花了好幾年時間製備光系統I蛋白的晶體,並嘗試用其他方法確定它的結構。另一個理由是,我們覺得光系統I的大小或許是個優點,因為即使最終只有一小部分衍射圖案,我們也能得到一張低解析度圖像,足夠辨認出它就是光系統I

要獲得蛋白質分子快照,我們首先要有光系統I的晶體。在傳統晶體學中,科學家製備大晶體用於X射線成像,是因為大晶體能散射更多的X射線,成像效果更好。但對一些蛋白質來說,往往需要數年的實驗才能得到排列有序的大晶體。對個別蛋白質來說,似乎根本沒法得到它的大晶體。光系統I就是其中之一。

相反,SFX成像技術使用的是在實驗室更容易製備的納米級小晶體。但使用納米晶體也帶來了新的挑戰:不僅要用它獲得足夠強的信號,還要克服一些基礎的物理難題,比如說如何檢測這些在顯微鏡下都看不到的晶體?以及如何把它們送向X射線脈衝的正前方,還要精確地在1秒內完成120次?

首先,我們需要找到一些新方法來看到這些納米晶體。其中一種方法叫做手性晶體的二階非線性成像(SONICC):晶體將兩束超快速紅外脈衝轉換為一個綠色光子,納米晶體被光子點亮,就像夜空中的螢火蟲,這樣我們就能檢測到它們。

另一個方法讓我們能夠以恒定的速率把蛋白質晶體射入X射線鐳射脈衝。約翰·C·H·斯彭斯(John C.H.Spence,本文作者之一)與亞利桑那州立大學的物理學家烏韋·魏爾斯塔爾(Uwe Weierstall)、布魯斯·多克(Bruce Doak)共同做出了一個功能類似於噴墨印表機的設備,把含有納米晶體的溶液流噴向X射線束。這個噴墨機非常精確,每次只允許一個納米晶體進入雷射光束。

為了防止設備堵塞導致納米晶體流中斷,魏爾斯塔爾設計了一個能產生細流的寬噴嘴。要達到這個效果,他用氦氣流包裹住噴嘴的末端,這樣儘管噴嘴本身很寬,但聚焦後晶體流只有人類頭髮直徑的幾分之一。

所有設備到位之後,我們還面臨著一個問題:如何處理海量數據?單次實驗就會產生高達100TB數據,足夠塞滿25臺頂級臺式電腦的硬碟。為了構建蛋白質的3-D圖像,我們必須找出數以萬計快照中的晶體取向,並把它們組合起來。因此,我們跟當時都是DESY查普曼團隊成員的理查德·基裏安(Richard Kirian)和托馬斯·懷特(Thomas White)合作開發了一款特殊軟體。借助這款軟體,我們能夠把海量的數據轉換成精確的3-D分子圖像。

揭開光合作用的秘密

一步一步地,我們的技術不斷提高。到了2014年,我們第一次觀察到了光合作用中兩個重要參與者,捕捉光的光系統I和鐵氧蛋白之間的電子傳遞過程。

當光照射到光系統I時,光被轉化成電子。接著,電子被鐵氧蛋白轉移,用於將CO2轉化為生物分子。當鐵氧蛋白離開時,光系統I蛋白馬上就溶解了,讓跟蹤這個反應變得異常困難。只有超高速的SFX成像技術才能捕捉如此迅速的變化。

這項研究的下一個挑戰,也是弗魯姆作為一名生物化學家重點關注的課題——弄清楚植物如何只用陽光和地球上最豐富的金屬(鐵)就能把水分解成氫氣和氧氣。如果人類能像植物那樣分解水,汽車和發電機就可以採用廉價、燃燒無污染的氫氣作為能源,這正是可再生能源經濟的終極夢想。


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